Žádné protilátky, otázky ohledně formulace, data neprůhledná. Co je špatného na vakcíně EpiVacCoron

Účastníci třetí fáze poregistračních klinických studií EpiVacCorona zaslali otevřený dopis ministerstvu zdravotnictví, Rospotrebnadzor a Vector. Tvrdí, že v jejich vzorku více než 50 % těch, kteří zdokumentovali svou účast ve studii, mělo negativní test na protilátky, ačkoli pouze 25 % účastníků mělo dostat placebo.

Podle údajů zveřejněných v profilových skupinách dostalo 53 % účastníků klinických studií (47 z 89 lidí) negativní test na protilátky a čtyři z 15 účastníků občanského očkování protilátky nezjistili.

Ve stejné době, v listopadu loňského roku, Vector oznámil, že dobrovolníci si vytvořili protilátky ve 100 % případů a ve většině případů se vytvořila buněčná imunita.

Během setkání s dobrovolníky centrum uvedlo, že očkování peptidovými antigeny poskytuje menší množství protilátek, ale mají neutralizační vlastnosti. Očkování nezaručuje ochranu před infekcí, ale může snížit virovou zátěž a vyhnout se rozvoji vážného onemocnění, dodal Vector.

„Na otázku, že titr je nízký: pokud chrání, ať je nízký. To je důvod, proč se dobrovolně účastníte této studie, abyste určili ochrannou úroveň imunitní odpovědi,“ řekl na setkání s dobrovolníky Alexander Ryzhikov, vedoucí oddělení zoonotických infekcí a chřipky ve společnosti Vector.

Na otázku dobrovolníků, zda by nebylo lepší nejprve zjistit všechny nuance a poté vakcínu otestovat na lidech, Vector odpověděl: „Podle výsledků studií bylo prokázáno, že vakcína chrání zvířata před intranazálním respiračním infekce koronavirem. Podle výsledků první fáze klinických studií se ukázalo, že vakcína je pro člověka neškodná.

Na konci ledna nařídil premiér Michail Mišustin vyčlenit 2 miliardy (27 milionů dolarů) na výrobu EpiVacKorony. Od února letošního roku se za tyto peníze plánuje vyrobit více než 2 miliony dávek.

Vakcínou EpiVacCoron se již na poliklinikách očkuje v rámci civilního očkování, i když ne tak aktivně jako Sputnik. Do konce loňského roku měly regiony podle Rospotrebnadzor obdržet 50 000 dávek. Zástupce šéfa Rady bezpečnosti Dmitrij Medveděv uvedl, že od druhé poloviny roku 2021 bude Rusko vyrábět 1,5 milionu dávek EpiVacCorony měsíčně.

Zároveň nebyla dokončena ani první a druhá fáze studií této vakcíny, ve kterých se vyvozují závěry o bezpečnosti podle údajů, které Vector poskytl RIA Novosti – existují pouze průběžné výsledky. Web Rospotrebnadzor uvádí, že druhá etapa klinických zkoušek byla dokončena na konci září. Třetí fáze výzkumu má být dokončena 15. června tohoto roku.

V žádné fázi zkoušek EpiVacCorona zatím nejsou žádné publikace v recenzovaných vědeckých časopisech.

Koronavirus zabíjí: hvězdy, které zemřely na pandemii

Co dobrovolníci chtějí?

Účastníci studií EpiVacCorona, kteří dostali vakcínu, nejprve prošli obvyklými postvakcinačními testy dostupnými v každé větší laboratoři. Tyto testy neukázaly vůbec žádné protilátky.

Dobrovolníci vytvořili skupinu na Telegramu, kde začali sdílet výsledky svých testů. Existuje i uzavřená skupina, do které se dostanete pouze potvrzením účasti na studiu doklady. Postupně se v těchto skupinách objevily desítky lidí s negativním testem na protilátky, ačkoliv splnili požadovanou dobu před testem. Účastníci testu dokonce popisovali vedlejší účinky vakcíny, které však byly velmi mírné: horečka, mírná bolest v místě vpichu a občas zarudnutí kůže.

Na konci roku 2020 společnost Vector oznámila, že po očkování touto vakcínou pouze jeden test ukáže ochranný titr – na protilátky proti peptidům, vyvinutý jejími vlastními vědci. Tento test můžete provést pouze v Moskvě v několika centrech.

Autoři dopisu zdůrazňují, že nepřítomnost protilátek v nich byla prokázána analýzou provedenou speciálně na testovacím systému Vector. Výjimkou je Andrey Krinitsky, zakladatel dobrovolnické skupiny a jeden z jejích nejaktivnějších účastníků. V rozhovoru pro BBC vysvětlil, že jako jeden z prvních testoval protilátky proti S-proteinu na testovacím systému centra Gamaleya – a má je. „Je málo lidí jako já, pár lidí,“ vysvětluje Krinitsky. Dosud neprovedl analýzu testovacího systému Vector.

Autoři dopisu Rospotrebnadzor žádají o zkrácení zkušební doby ze 180 na 42 dní a také o „zaslepení“ studie – tedy odhalit, kdo z účastníků dostal vakcínu a kdo placebo. . Neoficiálně jsou účastníci skupiny ve skutečnosti již zaslepeni, vysvětluje Andrey Krinitsky, pouze distribuce skupin vakcína/placebo se ukázala být přibližně 50/50, a ne 75/25, jak tvrdili ve Vektoru.

„Spojily se tři faktory současně – pandemie, placebo skupina a zahájení občanského očkování proti koronaviru. To dalo vzniknout tzv. „etickému dilematu placeba“. Protože nyní vystavují sebe a své okolí nepřiměřenému riziku,“ píše se v dopise.

Nedostatek těchto údajů je jednou z hlavních stížností na vakcínu EpiVacCoron, vysvětlují odborníci. Pro srovnání, vývojářům vakcíny Sputnik se podařilo publikovat data z první a druhé i třetí fáze výzkumu v autoritativním časopise The Lancet a tyto články vznikají na mezinárodní úrovni, molekulární biolog a zakladatel biotechnologické společnosti říká v rozhovoru pro BBC Sendai Viralytics v USA Olga Matveeva. A přestože vědci měli otázky ohledně publikovaných článků, transparentnost dat v případě Sputniku je v tuto chvíli mnohem vyšší.

Mezitím Rospotrebnadzor oznámil 100% účinnost vakcíny Vector. K tomuto závěru oddělení dospělo na základě výsledků první a druhé fáze klinických studií, kterých se zúčastnilo 86 lidí rovnoměrně rozdělených do skupin s placebem a vakcínou.

„Účinnost vakcíny spočívá v její imunologické účinnosti a preventivní účinnosti. Podle výsledků první a druhé fáze klinických studií je imunologická účinnost vakcíny EpiVacCoron 100%,“ uvedlo oddělení 19. ledna letošního roku.

Vector tvrdí, že imunita vůči koronaviru po očkování vakcínou EpiVacCorona vydrží rok.

„V zásadě věříme pověsti Vectoru a doufáme, že vakcína funguje dobře. Ale zatím to neexistuje žádné nezávislé potvrzení, “píší autoři dopisu Rospotrebnadzor.

Co se vědcům na EpiVacCoron nelíbí?

Vektoroví specialisté se chopili velmi ambiciózního úkolu, protože zatím neexistuje jediná peptidová vakcína schválená pro použití na světě. Existuje asi 100 syntetických peptidových vakcín, které dosáhly fáze 1-2 výzkumu, několik dosáhlo třetí fáze, ale žádná z nich nebyla uvolněna na trh.

Problémy s peptidovými vakcínami v zásadě spočívají v jejich nedostatečné imunogenicitě (schopnosti vakcíny vyvolat dostatečně silnou a stabilní imunitní odpověď) a nestabilitě.

„Jsem skeptický ohledně vakcíny Vector. Je postaven na peptidech, tedy malých proteinech, jejichž imunogenicitu je nutné zvyšovat různými přísadami. V podstatě nemůže pracovat. Jde jen o to, že to je jediná věc, která nějak vzešla z „šesti platforem“ inzerovaných společností Vector,“ řekl Kommersant virolog Alexander Chepurnov z Federálního výzkumného centra pro základní a translační medicínu. „Imunitní systém, aby rozpoznal „cizince“, musí mít před sebou poměrně velký protein. A peptidy jsou malé,“ dodal Chepurnov v rozhovoru pro BBC.

„Nezávislí odborníci nebo lékaři o této vakcíně vědí jen málo. Neexistují žádné vědecké publikace. Namísto deklarované 100procentní účinnosti máme stále velkou vědeckou neprůhlednost, “říká bioložka Olga Matveeva v rozhovoru pro BBC. Vakcína je třeba zlepšit a není připravena na zavedení do civilního oběhu, domnívá se odborník.

Když byla vakcína uvedena na trh a prezentována, hovořilo se o ní jako o „měkčí“ s méně vedlejšími účinky a tvrdilo se, že je bezpečná pro ty, kterým je Sputnik kontraindikován. Možná je to pravda, vysvětluje Matveeva, vakcína má ve srovnání se Sputnikem méně vedlejších účinků. „Nejdůležitější věcí u vakcíny je však její ochrana, tedy schopnost chránit se před nemocí. O takové schopnosti EpiVacCorony pro lidi nic nevíme,“ říká expert.

Za prvé, vědci mají otázky týkající se testovacího systému Vector, který vývojáři představili jako jediný pro detekci protilátek po očkování EpiVacCoronou.

Tento testovací systém není transparentní, není známo, zda detekuje protilátky proti kterému proteinu – nukleokapsid (N) nebo ve tvaru hrotu (S), vysvětluje Olga Matveeva.

„Předpokládáme, že [tento test] detekuje protilátky jak proti spike proteinovým peptidům, tak nukleokapsidovému proteinu současně, ale jsou to právě protilátky proti nukleokapsidovému proteinu, které jej „chytí“, říká expert. Mnoho očkovaných podle dobrovolníků skutečně vykazovalo imunitní odpověď specificky na nukleokapsidový protein.

Problém je v tom, že se nevytvářejí neutralizační protilátky proti nukleokapsidovému proteinu – těm, kteří jsou nejdůležitějšími bojovníky proti viru. Protilátky produkované v lidském těle proti virovým proteinům jsou různé, jde o unikátní spektrum. Pouze některé z nich jsou schopny virus neutralizovat.

„Je to schopnost vakcíny vyvolat produkci neutralizačních protilátek, která se často používá jako první (byť hrubé) kritérium pro hodnocení její účinnosti. Proto bych rád věděl, jaké jsou titry protilátek pro spike protein u dobrovolníků účastnících se klinických studií. Tito účastníci si zatím stěžují na absenci nebo velmi malý titr detekovatelných protilátek,“ píše Olga Matveeva ve svém článku „EpiVacCoron“: co víme a co nevíme“ ve vědeckém noviny Troitsky Variant.

Druhou otázkou, která vědce znepokojuje, je složení vakcíny, konkrétně peptidy zvolené vývojáři. Několik odborníků dotazovaných BBC se shoduje, že nechápou motivy pro výběr těchto peptidů.

„Primárním úkolem spike proteinových peptidů z vakcíny EpiVacCoron je stimulovat produkci protilátek, které dokážou rozpoznat virus a zabránit mu v infikování buňky. To znamená, že peptidy by měly obsahovat „příznaky nepřítele“ (viru) viditelné pro imunitní systém – virové antigenní determinanty,“ vysvětluje Olga Matveeva ve svém článku v Troitsky Variant.

„Četná experimentální práce ukazuje, že pouze malá část peptidů z virového spike proteinu je“ viditelná „pro lidský imunitní systém a může způsobit tvorbu neutralizačních protilátek,“ vysvětluje Matveeva.

Výše uvedené práce podle ní ukazují, že sedm peptidů popsaných v patentu EpiVacCorona může být umístěno ve fragmentech S-proteinu, které v zásadě nemohou u lidí vytvářet protilátky neutralizující viry.

Ve výše uvedených pracích byly závěry o tom, které peptidy by měly být přijaty, aby mohly být nakonec „rozpoznány“, učiněny na základě údajů od přeživších SARS-Cov-2, Margarity Romanenko, Ph.D. přednášek „Vakcíny proti Covidu -19: před volbou.“

Podle ní se žádný z peptidů zmíněných v článcích nekříží s těmi, které si tvůrci EpiVacCorona vybrali pro svou vakcínu.

Maska je nádherná: 20 fotek z celého světa:

„Tři peptidy [ve vakcíně] byly vybrány špatně, nejsou to peptidy, které byly publikovány jako epitopy pro lidi k rozvoji imunity,“ shrnuje rusky mluvící molekulární biolog z University of Edinburgh, který požádal, aby být jmenován. Navíc ve třech ze sedmi peptidů popsaných v patentu byla místa pro glykosylaci, což je proces, který může anulovat boj protilátek proti viru, i když jsou vyvinuty. Tento nárok na vakcínu popisuje Matveeva ve svém článku v Trinity Variant.

Protilátky, i když jsou produkovány, budou mít problém dostat se do blízkosti oblastí proteinu s připojenými polysacharidy kvůli glykanovému štítu – polysacharidovým molekulám připojeným ke spike proteinu. Z tohoto důvodu je nepravděpodobné, že by protilátky byly schopny virus neutralizovat nebo jej poškodit jiným způsobem, vysvětluje Olga Matveeva.

Zároveň myšlenka, kterou Vector vzal za základ – vyrobit vakcínu, která produkuje protilátky proti nukleokapsidovému N-proteinu – není špatný nápad, říká. N-protein je totiž mnohem „konzervativnější“ a nemění se, je schopen stimulovat jiný typ imunity – buněčnou.

Nyní mnoho lidí mluví o mutacích a o tom, že stávající vakcíny nemusí fungovat, když se virus změní. Mutace se vyskytují v S-proteinu ve tvaru hrotu. To znamená, že pokud by vakcína fungovala, její účinek by byl méně ovlivněn mutacemi koronaviru.

V rozhovoru s BBC odborníci poznamenávají, že přečtením patentu EpiVacCorona lze vidět, že titry protilátek ve studii vakcíny u králíků byly o dva řády vyšší u peptidů a o řád vyšší u plné -délka S-proteinu, než na lidech. „Vector“ v rozhovoru s dobrovolníky tento problém uznal. Řekli, že to pro ně bylo „poněkud nečekané“, když začali používat vakcínu. „Tato situace stále trvá,“ řekl Vector.

„Stát dodává lidem a lidem, kteří jsou oslabení, více ohroženi než ostatní, vakcínu, která je s největší pravděpodobností neúčinná. Myslím, že je to děsivé,“ říká molekulární biolog a PhD z University of Edinburgh.

Vakcínu EpiVacCorona v její současné podobě nelze předělat, lze ji pouze vyrobit novou, domnívá se.

Matveeva věří, že to lze zlepšit. „Ale i když se zvolí optimálnější peptidy, není jisté, že budou produkovat vysoký titr neutralizačních protilátek. N-protein viru vyvolává silnou imunitní odpověď T-buněk u lidí s Covid-19. Nevíme však, zda se totéž stane s N-proteinem z vakcíny a zda z něj jako imunogenu plyne nějaký přínos,“ poznamenává.

Je zvláštní, že Anna Popova, která stojí v čele Rospotrebnadzor od roku 2013, je uvedena jako jedna z autorek patentu EpiVacCorona. Vector je instituce podřízená Rospotrebnadzor a Rospotrebnadzor je orgán, který by měl kontrolovat výrobu vakcín a jejich soulad se všemi potřebnými normami. To může být považováno za střet zájmů.

Ruská služba BBC odeslala žádost společnosti Rospotrebnadzor a čeká na odpověď.

Možná vakcína chrání jinak?

Kromě humorální vzniká proti viru buněčná imunita, která slouží jako neméně důležitý prvek obranyschopnosti organismu. Je také schopen bojovat s infikovanými buňkami a zničit virus – ale jiným způsobem. Buněčná odpověď zabíjí buňky, které produkují virus.

T-buňky rozpoznávají cizí antigeny, ničí ty buňky, do kterých pronikly viry nebo bakterie, a také pomáhají dalším částem imunitního systému bojovat s nepřítelem. Buňky tohoto typu imunity se dělí na „pomocníky“ a „zabijáky“ – první rozpoznávají antigeny a posilují imunitní odpověď, druhé – zabíjejí patogen. Existují také paměťové buňky, které si pamatují původce onemocnění, takže v budoucnu by bylo pro tělo snazší bojovat s již známým virem nebo bakterií.

T buňky mají receptory, které reagují na invazi. S jejich pomocí se T-buňka začne dělit a „pomocníci“ aktivují další buňky k boji s patogenem a „zabijáci“ jej zabijí. T buňky se často nacházejí u uzdravených pacientů i v nepřítomnosti protilátek. Tato část imunitního systému je schopna rozpoznat infekci a poskytuje proti ní silnou ochranu.

Ve větší míře stimulují peptidové vakcíny produkci ochranných protilátek. A pokud se na N-proteinu během imunizace peptidovou vakcínou vytvoří silná odpověď T-buněk, pak se proti němu zpravidla vytvářejí také protilátky, poznamenává Matveeva. „Nejsou potřeba k boji s infekcí, ale jejich vznik lze považovat za indikátor celkové imunitní odpovědi na vakcínu, včetně odpovědi T-buněk, což je obzvláště cenné,“ vysvětluje odborník. Ale, jak je uvedeno výše, většina účastníků studie nemá protilátky.

Testy na buněčnou imunitu v Rusku prakticky nejsou k dispozici. Moskvané mají dvě možnosti, jak v takovém testu projít.

Můžete to udělat zdarma na poliklinikách v rámci studie „Posouzení intenzity buněčné a humorální imunity vůči původci Covid-19 u obyvatel města Moskvy.“ Nejprve se účastníkům dokonce rozdávaly výsledky, ale v prosinci média zjistila, že s tím přestali.

„Poslali jsme výsledky, ale lidé měli spoustu otázek, co to znamená. Lidé začali vyvozovat nejednoznačné závěry, které na základě těchto výsledků zatím nelze vyvodit. Proto byl vydán příkaz zatím výsledky nevydávat. Vědecká centra analyzují pouze obecnou řadu dat, aniž by je izolovala jednotlivě, “bylo to tehdy na horké lince sděleno Business FM.

V Moskvě se také objevil test buněčné imunity vyráběný společností Generium, jeho cena je 18 700.

I když uzdravená nebo očkovaná osoba obdrží výsledky testu imunity T-buněk, bude obtížné správně interpretovat její údaje. Výsledky uvádějí pouze to, zda existují známky takové imunity. Existují možnosti testování s podrobnějšími údaji. Další výklad může provést pouze odborník – a ne každý.

Kontrola hladiny protilátek je jednodušší a srozumitelnější způsob, jak posoudit, zda existuje ochrana proti patogenu. I když podle vysvětlení odborníků je v tomto procesu také mnoho nuancí.

Co jste řekli ve Vectoru?

V úterý 2. února se účastníci iniciativní skupiny dobrovolníků setkali s přednostou Oddělení zoonotických infekcí a vektorových chřipek Alexandrem Ryžikovem a zástupcem managementu kvality, přednostou Oddělení biologické a Technologická kontrola, Marina Bogryantseva. Protokol z jednání připravovali a odsouhlasili dobrovolníci spolu s Rospotrebnadzor téměř týden.

Vector odpověděl na část nároků, ale některé otázky zůstaly nevyřešené.

Výběr peptidů, ke kterým měli vědci dotazy, byl ve Vectoru zdůvodněn tím, že vypočítali „nejkonzervativnější (lineární – BBC) a nejméně zkříženě reaktivní epitopy k lidským proteinům (místa ve viru, pro která imunitní systém se může „zaháknout“ – BBC), přičemž má potenciální ochranu.“ „Nebyly použity speciální algoritmy pro výběr nejimunogenních epitopů,“ poznamenal Ryzhikov.

„Odpověď na tuto otázku mě opravdu překvapila, protože jsem očekával, že uslyším, že „Vektor“ používá nějaký proprietární prediktivní algoritmus. Zdá se ale, že nebyly použity vůbec žádné algoritmy a je naprosto nejasné, na jakém principu je výběr lokalit založen,“ píše na svém Facebooku jeden z účastníků skupiny dobrovolníků, molekulární biolog Denis Lagutkin.

Prohlášení, že byly vybrány konzervativní (lineární) epitopy, se Lagutkinovi zdá „podivné“ kvůli jejich „zjevně slabé imunogenicitě a pochybné sterické dostupnosti (schopnosti protilátky vázat se na epitop – BBC). Během období, kdy se ve Vectoru navrhovaly peptidy, byly popsány pouze dvě mutace v spike proteinu, vysvětluje, a Vector se nezabýval předpovídáním variant mutací koronaviru. Předpoklady o možných mutacích byly vytvořeny na základě jiných koronavirů.

„Algoritmy třetích stran pro výběr nejimunogenních epitopů nebyly použity, protože nejimunogenní epitopy často podléhají mutacím a virus je tak schopen uniknout imunitní reakci,“ řekl Ryzhikov na setkání. „Záměrně jsme se vyhnuli vyvolání reakce v oblastech, které by mohly stimulovat vznik nových mutací, které umožňují viru uniknout imunitní reakci,“ řekl.

„Imunodominantní epitopy (trojrozměrné), na rozdíl od lineárních, skutečně podléhají změnám,“ říká Olga Matveeva. Lineární se nemění. V tom má Ryzhikov pravdu, poznamenává. Ale protilátky u dobrovolníků jsou stále velmi malé nebo chybí. „Ani jeden imunolog vám nemůže říct, jaká může být ochrana v tomto případě,“ říká Matveeva.

Použití pouze jednoho specifického testovacího systému pro detekci protilátek ve Vectoru bylo vysvětleno skutečností, že citlivost konvenčních komerčních testů nemusí být dostatečná k detekci té části protilátek, která cílí na určité fragmenty, které tvoří EpiVacCorona. Odpověď na otázku, na které proteiny je testovací systém zaměřen, nebyla ve Vectoru dána.

Vector poznamenal, že je možné zkrátit dobu studie na tři měsíce, což znamená, že účastníci budou „oslněni“ a bude jasné, kdo dostal vakcínu a kdo placebo. O tom rozhodne Ministerstvo zdravotnictví po prostudování průběžné zprávy, která se předkládá po 42. dni studie.

Vektor umožnil účastníkům studie podstoupit přeočkování. „Nezakazujeme přeočkování, ale musíme myslet na to, jak funguje imunitní systém během imunizace, například vektorovou vakcínou, peptidovou vakcínou, infekcí. Pokud mluvíme o načasování, doporučujeme dodržet mezi očkováním alespoň tři měsíce, “řekl Ryzhikov.

Podle Andrey Krinitsky jsou dobrovolníci se setkáním obecně spokojeni a doufají, že „to není nehoda, ale nová móda pro úřady i občany – přímý interaktivní dialog.“

Nejdůležitější otázka však podle Krinitského v současnosti není s jistotou zodpovězena. „V experimentech byly ochranné vlastnosti vakcíny testovány na zvířatech. Existuje ochrana pro člověka a jaký titr protilátek je pro něj dostatečný? Abychom na tuto otázku odpověděli, probíhá třetí fáze klinického výzkumu a my provádíme nezávislý experiment, “řekl v rozhovoru pro BBC.

Některé informace shromážděné účastníky testu byly pro Vector nové a nyní se studují samostatně, řekl. Komunikace s Vectorem pokračuje, poznamenal Krinitsky.

Co dalšího je známo o EpiVacCoron?

Vakcína EpiVacCorona Centra pro výzkum vektorů byla zaregistrována v Rusku 13. října 2020. Jde o druhou vakcínu proti koronaviru registrovanou v zemi po Sputniku V.

EpiVacCorona se skládá ze tří různých fragmentů S-proteinu koronaviru SARS-CoV-2, které jsou připojeny k nosnému proteinu. Tyto fragmenty se nazývají peptidy, a proto se vakcína nazývá peptidová vakcína. Nosičový protein se skládá z fragmentů nukleokapsidového proteinu obklopujícího RNA koronaviru. Tento virový nukleokapsidový protein je syntetizován bakterií E. coli. Složení vakcíny je posíleno adjuvans – hydroxid hlinitý působí v jeho roli.